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注意!广告宣称的氨基硅烷涂层均匀性存在不一致现象

研究背景

涉及cDNA/PCR的实验常使用氨基硅烷处理的玻璃作为基底,但这些实验往往产生未达预期的结果。我们的分析表明问题可能源于实验初期阶段的玻璃基底制备过程。通过技术手段发现,氨基硅烷并未形成均匀涂层,而是以仅覆盖约1%玻璃表面的小岛状结构存在,这与预期中完全覆盖的氨基硅烷涂层基底截然不同。

图1:样品形貌分析。聚集体宽度较小,但高度可达10 nm。
图2:化学映射图显示氨基硅烷仅形成小型岛状结构(红色:1623 cm⁻¹,蓝色:1678 cm⁻¹),其周围绿色区域(1060 cm⁻¹)为裸露玻璃基底。

结果

采用光诱导力显微镜(PiFM)技术对氨基硅烷涂层玻璃进行分析,结果如图2(化学分布图)和图3(图1中六个位点的光诱导力红外点光谱)所示。从图3可见,基底的红、绿色点光谱与未处理的参考玻璃光谱(深蓝色虚线)基本一致,仅在2800-2000 cm⁻¹区间出现强度增强,且最关键的是在1630 cm⁻¹附近未出现任何胺基特征峰。仅聚集体区域显示胺基峰。这表明问题源于基底本身,且错误在实验初期阶段即被引入。

图3:​ 样品中鉴定出的化学物质对应波长分布

差异性分析​

传统光谱方法(如X射线光电子能谱XPS、掠角傅里叶变换红外光谱、椭圆偏振仪及水接触角测量)可准确识别氨基硅烷的存在,但缺乏评估玻璃基底涂层覆盖度所需的空间分辨率。这些技术均基于大面积区域采样,无法验证基底是否被单分子层均匀覆盖。

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